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邻苯二甲醛试剂用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。

胆固醇及其脂在强酸存在下与邻苯二甲醛反应，产生紫红色化合物，该化合物在550nm波长处有最大吸收峰，分光光度计在550nm处进行比色测定，胆固醇含量在4mg/mL之内与吸光度呈良好线性关系。

• 蒸馏水、生理盐水或PBS、浓硫酸
  
• 试管或离心管、分光光度计

• 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
  
• 本法可直接用于检测脑脊液中的TC含量，也可直接检测尿液中的TC含量。
  
• 待测样本如不能及时测定，应置于2～8℃保存，3天内稳定。
  
• 如果样本TC浓度过高，结果可能呈假性降低，应用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 样本处理：
  
  • 血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。
  • 细胞样本：
    
    • 取适量的细胞(一般推荐>10⁶以上)，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
      
    • 用PBS或生理盐水清洗1～2次，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。
      
    • 加入200～300μL PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3～5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。亦可用1～2% Triton X-100冰浴30～60min，制备好的裂解液不可离心，待用。
  • 组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)∶生理盐水(ml)=1∶4的比例，加入生理盐水，冰浴条件下手动或机械匀浆。2500～3000g离心10min，取上清待用。
• 配制邻苯二甲醛试剂：取100mg邻苯二甲醛粉剂准确加入邻苯二甲醛稀释液100mL，充分混匀，即为邻苯二甲醛试剂或邻苯二甲醛工作液。4℃避光保存，2周有效。
  
• 其余操作步骤请参考总胆固醇检测试剂盒(邻苯二甲醛比色法)。